期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
抗人整合素ανβ3单链抗体的构建和表达
王臣；侯利华；张彦明；李建民；廖振林；杜桂鑫；陈薇；孙启鸿；童贻刚
关键词：单链抗体, 整合素ανβ3, 构建, 表达
摘要：目的:利用基因工程抗体技术构建抗人整合素ανβ3单链抗体(scFv).方法:从分泌抗人整合素ανβ3单抗(mAb)的杂交瘤细胞E10总RNA中,用RT-PCR扩增VH和VL基因,对其核苷酸序列分析后,通过PCR在VH和VL基因间插入柔性连接子(Gly4Ser)3,组装成scFv基因,并克隆至原核表达载体pTIG-TRX中.以重组子转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导目的基因表达.结果:转化菌可表达相对分子质量(Mr)为31 000的scFv.Western blot证实,具有His6标签蛋白的表达.经低剂量的IPTG诱导和较低温度培养,scFv获得了可溶性形式表达.表达产物经Ni-NTA琼脂糖层析纯化后纯度达91%以上.ELISA鉴定证实,scFv具有良好的抗原结合活性.结论:成功地构建并表达抗人整合素ανβ3的scFv,为进一步临床研究奠定了基础.
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