期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人IL-1RⅡ基因的克隆及其表达
胡艳秋；刘嘉茵；卢春；王淑玉
关键词：蛋白表达, 人IL-1RⅡ基因, 基因克隆
摘要：目的:克隆人IL-1RⅡ基因,构建其逆转录病毒载体,以探讨其在IL-1主导疾病中的作用.方法:用RT-PCR法从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆人的IL-1RⅡ基因.将其克隆到原核表达质粒PET22b中,构建重组质粒PET22b-IL-IRⅡ.将该重组质粒依次进行PCR、酶切鉴定及测序后,转化BL21菌,以IPTG诱导表达.表达产物用Western blot鉴定.另外,将以酶切重组质粒PET22b-IL-1 RⅡ所获IL-1 RⅡ基因的全长ORF,克隆到逆转录病毒质粒中并转染293细胞,用免疫组化染色法检查IL-1RⅡ基因的表达.结果:用RT-PCR法,从人PBMC中扩增出1 203 bp的cDNA,测序证实为人IL-1RⅡ基因.Western blot表明,重组质粒可表达IL-1RⅡ蛋白.免疫组化染色表明,IL-1RⅡ重组逆转录质粒可在293细胞中高效表达IL-IRⅡ蛋白.结论:成功地克隆了人IL-1RⅡ基因,构建了其原核表达载体和重组逆转录病毒载体,并在BL21菌中表达IL-1RⅡ重组蛋白,为进一步研究IL-1RⅡ基因在相关疾病中的作用创造了有利条件.
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