期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2004年第04期

云南个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞株cDNA文库构建和鉴定

李海红;马丽菊;王秦秦

关键词:肺癌, cDNA文库, 构建, 鉴定
摘要:目的:构建云南个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞株的cDNA文库.方法:从培养的人肺鳞癌YTMLC-90细胞株中提取总RNA,利用经修饰的oligo(dT)引物(含SfiⅠ B酶切位点)合成cDNA第1链.同时,根据真核生物mRNA 5′端帽子结构的特点,利用SMART核苷酸(含SfiⅠ A酶切位点)作为cDNA第1链在mRNA 5′端延伸出去的模板.以此序列为引物,利用LD-PCR(long-distance PCR)合成双链cDNA.双链cDNA经SfiⅠ(Ⅰ A和Ⅰ B)酶切和过柱分级分离后,克隆入经SfiⅠ酶切的载体λTripIE×2,经体外包装即为cDNA文库.结果:人肺癌细胞株YTMLC-90的cDNA文库中,含有1.01×109pfu/L个重组子,重组率为93.2%.将该文库扩增后,克隆数可达5.24×1012pfu/L,插入cDNA的长度为750~3 000 bp.结论:所构建的cDNA文库具有较好的质量,为进一步筛选、克隆肺癌特异性表达基因奠定了基础.