期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2004年第04期

pcDNA3.1/hTSHR真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

詹升华;张徽;刘纯

关键词:人促甲状腺激素受体, pcDNA3.1, COS-7细胞, 转 染, 动物模型
摘要:目的:构建pcDNA3.1(+)人促甲状腺激素受体(hTSHR)基因真核表达载体,并在COS-7细胞中进行表达.方法:以限制性内切酶EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切pBluescript SK(-)/hT-SHR,获得hTSHR cDNA的全长片段,在以低熔点琼脂糖回收纯化后,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆酶切位点中,构建重组体pcDNA3.1/hTSHR,进行酶切、PCR及测序鉴定.通过脂质体介导,转染COS-7细胞进行瞬时表达,并用RT-PCR和免疫细胞化学染色法检测hTSHR的表达.结果:双酶切pBluescript SK(-)/hTSHR得到约2 700 bp含TSHR全长cDNA的片段,同预期片段的大小相符.所构建的pcDNA3.1/hTSHR经双酶切及PCR鉴定同预期大小相符;测序结果与GenBank中收录的hTSHR全长序列一致,表明真核表达质粒构建正确.以脂质体转染COS-7细胞后,用RT-PCR和免疫细胞化学染色法检测表明,细胞可表达hTSHR.结论:成功地构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/hTSHR,为进一步研究TSHR的功能,以及利用hTSHR真核表达载体建立Graves实验动物模型奠定了基础.