期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
抗HEV中和抗体13D8的单链抗体的构建及表达
李利峰；罗文新；顾颖；朱子恒；王颖彬；张军；夏宁邵
关键词：HEV, 单链抗体, 原核表达
摘要：目的: 降低HEV中和性单抗(mAb)13D8的鼠源性, 表达其单链抗体(scFv).方法: 从分泌13D8鼠mAb的杂交瘤细胞中, 通过RT-PCR克隆mAb的VL、 VH基因, 并进一步组装成VH-linker-VL型的scFv片段.将scFv片段克隆到pTO-T7载体中, 在大肠杆菌中进行表达.用ELISA、 Western blot检测scFv的活性.结果: SDS-PAGE表明, 13D8的scFv在E.coli中得到高效表达, 表达量达菌体总蛋白的26.8%左右, 表达产物主要以包涵体的形式存在.间接ELISA和Western blot检测表明, 表达的13D8的scFv能与HEV OFR2区中一段重组蛋白(NE2)特异结合.竞争ELISA表明, scFv与原鼠mAb识别的为同一表位.结论: 成功地表达出具有免疫学活性的13D8的scFv.
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