期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
兔抗STAT5抗体的制备及其在乳腺癌诊断中的应用
陈晶；单保恩；陈兴；马洪
关键词：STAT5, 抗体, 乳腺癌, 细胞系, 免疫组化染色, 兔
摘要：目的:制备并纯化兔抗小鼠脾信号转导和转录激活因子5(STAT5)的抗体,分析其在乳腺癌细胞以及良恶性乳腺组织中的表达.方法:应用重组小鼠STAT5蛋白,常规免疫雄性新西兰兔制备抗STAT5抗体,并用盐析法和离子交换层析技术进行纯化.用免疫印迹法(Western blot)检测抗STAT5抗体的纯度和特异性,以及乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中STAT5蛋白的表达;用免疫组化SP法检测STAT5在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达.结果:以重组小鼠STAT5蛋白免疫新西兰兔6 wk后,用间接ELISA法检测静脉血中STAT5抗体的效价为1:204 800(A450=1.07).将STAT5经SDS-PAGE分离,可见1条相对分子质量(Mr)为90 000～95 000的蛋白带,与文献[3]的报道相符.用抗STAT5血清做Western blot分析显示,在Mr为90 000～95 000处也有1条明显的带,证明是抗STAT5的特异性抗体.将人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231的细胞浆和细胞核蛋白,与所制备的抗STAT5抗体均可起反应.人乳腺组织切片用抗STAT5抗体做免疫组化染色显示,在正常乳腺组织细胞浆中可见棕黄色颗粒,而在乳腺癌组织的细胞浆和细胞核中可见棕黄色颗粒.结论:制备了高效价、特异性的兔抗STAT5抗体.用该抗体检测证实,STAT5只在正常乳腺组织的细胞浆中表达,而在乳腺癌细胞STAT5的细胞浆和细胞核中均有表达,提示发生乳腺癌后,STAT5可由细胞浆易位入细胞核中表达,可作为乳腺癌临床诊断的参考指标.
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