期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人上皮细胞黏附分子融合蛋白真核表达载体的构建、表达及初步鉴定
王春艳；谢鑫；宋朝君；金镇勋；欧阳为明；金伯泉
关键词：上皮细胞黏附分子, 真核表达, 增强型绿色荧光蛋白
摘要：目的: 构建pIg-EpCAM及pEGFP-EpCAM真核表达载体, 并在COS7细胞中表达.方法: 用PCR扩增EpCAM cDNA, 酶切后分别与pIg及pEGFP两种载体连接, 用脂质体法转染COS7细胞.用免疫沉淀法检测pIg-EpCAM的表达产物; 用荧光显微镜观察EpCAM-GFP的表达.结果: DNA序列测定的结果显示, pIg-EpCAM及pEGFP-EpCAM载体的构建正确.免疫沉淀的结果显示, 转染pIg-EpCAM的COS7细胞的培养上清中含有相对分子质量(Mr)为65 000的融合蛋白, 该蛋白与抗人IgG Fc段的mAb具有良好的免疫反应性.荧光显微镜观察可见, 转染空载体pEGFP的COS7细胞中绿色荧光均匀地分布于胞质和胞核; 而转染pEGFP-EpCAM的COS7细胞中绿色荧光主要分布于细胞表面.结论: 成功地构建了两种EpCAM的真核表达载体, 并在COS7细胞中表达, 为EpCAM的功能研究创造了条件, 并为制备抗EpCAM的mAb提供了免疫原.
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