期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人VEGF165基因真核表达质粒的构建及其对血管内皮细胞增殖的影响
吴忠均；吴维伟；余林；时德；郑树森
关键词：真核表达质粒, 血管内皮生长因子165, 血管内皮细胞, 基因转染, 器官移植
摘要：目的: 构建人VEGF165基因的真核表达质粒pBudCE4.1/VEGF165, 观察其在血管内皮细胞(VEC)中的表达和表达产物对VEC增殖的影响.方法: 用RT-PCR法从引产胎儿心脏组织中克隆VEGF165基因, 并将其克隆至真核表达质粒pBudCE4.1中, 对重组真核表达质粒pBudCE4.1/VEGF165进行酶切鉴定和测序.以脂质体转染法将pBudCE4.1/VEGF165导入VEC中, 用Northern blot和免疫细胞化学染色法, 分别从mRNA水平和蛋白质水平检测它们在转染的VEC中的表达, 并检测表达产物对VEC增殖的影响.结果: 人VEGF165基因的RT-PCR产物为576 bp.测序结果显示, 扩增的VEGF165基因的序列与基因文库中登录的序列完全一致.经Hind Ⅲ和BamH I酶切鉴定证实, VEGF165基因已成功地克隆至真核表达质粒pBudCE4.1中.以其转染血管内皮细胞(VEC)后, 经Northern blot杂交和免疫细胞化学染色法检测均证实VEGF165基因表达.表达产物对VEC增殖有明显的促进作用.结论: 所构建的pBudCE4.1/VEGF165真核表达质粒可在VEC中表达, 表达产物可明显促进VEC增殖, 为通过VEGF165基因转染防治移植器官内血管的狭窄奠定了基础.
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