期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2004年第06期

人PD-L1 cDNA的克隆及其胞外区蛋白在大肠杆菌中的表达

何贤辉;徐丽慧;刘毅;蔡小嫦;曾耀英

关键词:PD-L1, cDNA克隆, 淋巴细胞, 重组蛋白
摘要:目的: 克隆人PD-L1基因的cDNA并构建PD-L1胞外区基因的原核表达载体, 在大肠杆菌中进行表达.方法: 以RT-PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中, 扩增并克隆PD-L1的cDNA, 构建PD-L1胞外区基因的原核表达载体, 在大肠杆菌BL21(ED3)中进行表达并鉴定.结果: 克隆到PD-L1 cDNA编码区的全长序列, 经DNA测序证明其与已报道的序列一致.同时构建了在羧基端带有His6标签的PD-L1胞外区基因的原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达.免疫印迹分析表明, 在IPTG诱导后表达的PD-L1胞外区蛋白, 相对分子质量(Mr)为25 000, 与理论值的大小相符.该重组蛋白能与抗His6标签的单抗(mAb)特异性反应.结论: 成功地克隆PD-L1基因, 其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达, 为利用PD-L1转基因修饰移植物或以PD-L1重组蛋白抑制移植排斥反应等研究提供了条件.