期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
重组质粒pYTA/Aβ-HBcAg的构建及其在大肠杆菌中的表达
冯改丰；胡海涛；董炜疆；王全颖；杨广笑
关键词：阿尔茨海默病, β-淀粉样肽, HBcAg, 免疫原性, 疫苗
摘要：目的: 研究β-淀粉样肽(Aβ)与HBcAg的融合基因Aβ-HBcAg的原核表达, 并检测表达的融合蛋白Aβ-HBcAg的免疫原性. 方法: 从重组质粒7Z/Aβ-HBcAg中, 切下含Aβ-HBcAg的基因片段, 将其融合于质粒pYTA1的lac启动子之后, 构建重组表达质粒pYTA/Aβ-HBcAg.以此重组质粒转化大肠杆菌DH5α, 在IPTG诱导下表达.超声破碎表达的细菌, 通过SDS-PAGE及考马斯亮蓝染色, 检测融合蛋白Aβ-HBcAg的表达.采用ELISA法检测融合蛋白的反应原性. 融合蛋白经饱和硫酸铵盐析法分离和纯化后免疫BALB/c小鼠, 用ELISA法检测血清中抗-Aβ抗体的滴度.结果: 融合蛋白以可溶性形式存在于细菌裂解液的上清中, 其表达量为菌体总蛋白量的7% .表达的融合蛋白既有Aβ的反应原性, 又有与HBcAg的反应原性.经3次免疫后, BALB/c小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度高可达为1∶ 16 000.结论: 融合基因Aβ-HBcAg可在大肠杆菌DH5α中表达. 表达产物为可溶性蛋白, 存在于细菌裂解液的上清中, 具有较强的免疫原性.本研究为正在进行的AD基因工程疫苗的动物实验打下了基础.
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