期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2003年第03期

GST-GP302融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备

苏丽;赵敬湘;王波;张玉华;管利东;王字玲

关键词:血小板 GPIbα, 大肠杆菌, 表达, 多克隆抗体
摘要:目的: 在大肠杆菌中表达血小板糖蛋白GPIbα之vWF结合区(GP302)与谷胱甘肽S-转移酶GST的融合蛋白并制备其抗血清 . 方法: 将GP302片断插入GST融合表达载体pGEX-4T-1, 重组载体酶切鉴定后, 在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST-GP302融合蛋白, SDS-PAGE分析表达产物.包涵体经变性复性后免疫新西兰白兔, 制备抗血清, ELISA、Western blot检测重组抗原的免疫活性.结果: 重组质粒酶切鉴定表明, GP302基因已正确插入到pGEX-4T-1中, 经IPTG诱导后, 表达出相对分子质量(Mr)约为 59 000的融合蛋白, 获得了ELISA效价为1×10-5的多克隆抗体.Western blot证明所制备的多抗可以与血小板糖蛋白特异性结合.结论: GP302片断在大肠杆菌中的成功表达及制备得到的多克隆抗体, 为检测血小板糖蛋白GPIbα及其在其他体系中的表达提供了一种检测途径.