期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志

- 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号:1007-8738
- 国内刊号:61-1304/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人KIR2DL1-Ig融合蛋白在COS-7细胞的表达
颜卫华;范丽安
关键词:KIR2DL1, 融合蛋白, 基因表达
摘要:目的: 获得人KIR2DL1分子(killer Ig-like receptor 2DL1)胞外区与人IgG Fc段的融合蛋白.方法: 从人外周血单个核细胞中提取总RNA, 通过RT-PCR扩增编码KIR2DL1胞外段cDNA, 经Nhe Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后, 定向插入真核细胞表达载体CD5lnegl中.构建的重组真核表达载体CD5lnegl-KIR2DL1.经酶切分析和测序鉴定后, 通过DEAE-dextran/chloroquine法转染COS-7细胞.瞬时表达后, 取培养上清液经亲和层析、ELISA、SDS-PAGE及Western印迹,鉴定融合蛋白的表达及其免疫学活性.结果: 序列测定证实, 该重组表达载体含有正确的KIR2DL1胞外区基因序列.重组真核表达载体CD5lnegl-KIR2DL1转染COS-7细胞后, ELISA法检测细胞培养上清中有融合蛋白的表达.SDS-PAGE结果显示, 该融合蛋白的相对分子质量(Mr)约为73 000.Western印迹结果证实, 该蛋白能被特异性单克隆抗体(mAb)EB6所识别.结论: KIR2DL1-Ig融合蛋白表达载体成功构建并在COS-7细胞中获得功能性表达, 为KIR2DL1的功能及其配体MHC的研究奠定了基础.
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