期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2003年第06期

人CD81分子的肝组织特异性稳定表达

贾帅争;吕丽萍;刘敏霞;詹林盛;王海平;王全立

关键词:丙型肝炎病毒, 受体, CD81, 小鼠
摘要:目的: 用肝组织特异性启动子, 实现人CD81分子在小鼠肝癌细胞Hepa 1- 6中的稳定表达. 方法: 从能感染丙型肝炎病毒(HCV)的人肝癌细胞系HepG2中提取RNA, 用随机引物合成cDNA的第1条链, 然后用人CD81基因的特异性引物进行PCR扩增, 克隆PCR扩增片段.将经测序证明为人CD81基因的正确序列, 连接到肝特异性启动子的下游, 使CD81基因的3′端与SV40 polyA加尾序列融合, 得到肝组织特异性表达的人CD81融合基因片段.将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3中, 转染小鼠肝癌细胞系Hepa 1- 6.经G418加压筛选后, 分别用RT-PCR检测人CD81 mRNA的转录, 用FACS检测人CD81蛋白的表达. 结果: 克隆序列的测序结果与GenBank中登录的序列进行对比表明, 得到了人CD81 cDNA的正确序列.构建的人CD81肝特异性融合基因片段可稳定转染Hepa 1- 6细胞, 并可检测到人CD81在mRNA水平上的转录和在蛋白质水平上的稳定表达.结论: 由于CD81是HCV的感染受体, 稳定表达HCV感染受体-人CD81分子的小鼠肝癌细胞克隆的获得, 为今后研究HCV包膜蛋白与CD81的相互作用、筛选感染阻断药物, 以及发展HCV感染的小鼠动物模型奠定了基础.