期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库的构建和鉴定
廖博；马保安；张惠中；龙华；范德刚；范清宇
关键词：骨肉瘤, 反转录, cDNA文库
摘要：目的: 构建骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库, 为筛选骨肉瘤特异性抗原创造条件. 方法: 从9901细胞中提取总RNA, 分离mRNA, 反转录合成双链cDNA, 末端削平, 和EcoRⅠ适配子连接.磷酸化EcoRⅠ适配子5′端, 过Sephacryl-S400柱除去小于400 bp的cDNA片段, 与噬菌体λgt11(载体)连接, 用包装蛋白体外包装后形成初级cDNA文库.取适量包装体系倍比稀释后感染E.coli Y1090, 测定文库克隆数、重组率, 用PCR法测定cDNA插入片段的大小.后扩增cDNA文库. 结果: 建成含1.5×106个重组子的骨肉瘤9901细胞cDNA表达文库, 重组率为94.3%.重组子中插入的外源片段不小于0.5 kb, 平均长约1.4 kb. 结论: 达到良好文库的质量标准, 适合进一步筛选目的cDNA克隆.
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