期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2003年第06期

用于构建抗人TNF嵌合抗体的鼠单克隆抗体中和活性的鉴定

朱参胜;欧阳为明;刘雪松;曹云新;赵宁;金伯泉

关键词:TNF, MAB, 中和活性, 嵌合抗体
摘要:目的: 筛选构建抗人TNF嵌合抗体所需高质量的鼠源性mAb. 方法: 从一组分泌抗人TNF mAb杂交瘤细胞中, 挑取3株D2、E6和F6, 按常规方法制备腹水.用饱和硫酸铵盐析后, 分别用蛋白A亲和层析和QFF阴离子交换层析法, 纯化D2株分泌的mAb(IgG2b)和E6和F6株分泌的mAb(均为IgG1).纯化前后, 3株mAb的效价, 采用间接ELISA法测定.纯化的3株mAb的中和活性, 通过它们对TNF诱导的L929细胞死亡和上调ECV304细胞上ICAM-1表达的抑制作用来进行鉴定.结果: 间接ELISA检测表明, 3株mAb D2、E6和F6纯化前的效价分别为1×10-6、1×10-7和1×10-7, 纯化后效价分别为0.01、0.002和0.002 mg/L.mAb中和活性的检测表明, 浓度为0.16、0.40和0.50 mg/L的D2、E6和F6, 可保护2×104 U/L TNF诱导的L929细胞半数不发生死亡.1.0 mg/L的mAb D2、E6和F6, 对2×105 U/L TNF使ECV304细胞上ICAM-1表达上调的抑制率, 分别为70.1%、60.1%和60.1%; 3株mAb的浓度降到0.1 mg/L时, 抑制率仍可达到60.1%、53.7%和59.0%.结论: 所选3株mAb的效价及中和活性均较高, 可作为抗人TNF嵌合抗体的候选mAb.