期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
CML66基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
尤强；程琳玲；王颖；王树军；张惠珍；葛海良
关键词：CML66, 原核表达, 蛋白纯化, 多克隆抗体
摘要：目的: 获得原核表达的新的肿瘤抗原CML66蛋白, 并制备兔多克隆抗体.方法: 采用RT-PCR技术从睾丸中获得CML66的cDNA, 亚克隆至pGEMT载体中, 经测序确证后, 将该基因插入原核表达载体pET32b(+)中, 通过电穿孔技术转化E.coli表达菌BL21(DE3), 以IPTG诱导6×His融合蛋白的表达, 并经Ni2+亲和柱层析纯化.通过SDS-PAGE、Western blot鉴定后, 应用纯化蛋白免疫家兔, 制备多克隆抗体.结果: 获得的CML cDNA序列与GenBank登录的cDNA序列一致.用纯化的目的蛋白免疫家兔后, 获得高滴度的特异性兔抗血清.结论: 成功地克隆CML66基因, 建立了原核表达、纯化体系.制备纯化的CML66蛋白和高滴度、特异的兔抗血清.
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