期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
二硫键稳定的抗肝癌人源化scFv-hTNFα突变体融合基因在大肠杆菌中表达
孙志伟；俞炜源；孙岩；吴涛；林建波；刘彦仿
关键词：肝细胞肝癌, 单链抗体, TNFα, 突变体, 靶向细胞因子, 可溶性表达
摘要：目的提高抗肝癌抗体靶向人肿瘤坏死因子(hscFv25-hTNFα)的稳定性和杀伤活性,并探讨该新型靶向细胞因子在大肠杆菌中的可溶性表达.方法以引物PCR法和重叠延伸PCR法,对人源化抗肝癌hscFv25及hTNFα基因进行定点突变,构建重组表达载体pGEX-hFvT,并以IPTG在大肠杆菌中诱导表达.用免疫组化染色和MTT比色法, 分别检测重组蛋白的抗体和hTNFα突变体的双重活性.结果重组基因在大肠杆菌中获得高效可溶性表达.表达产物具有抗体和hTNFα突变体的双重活性,重组蛋白的稳定性得到大幅度提高,抗体活性于4℃放置3个月活性无明显下降,抗肿瘤活性较天然hTNFα高4倍.结论重组基因在大肠杆菌中获得了高效功能性表达;重组蛋白稳定性及抗肿瘤活性得到大幅度提高,为进一步的临床应用研究奠定了基础.
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