期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
中国株HIV-1结构蛋白基因gag与gp120在巴斯德毕赤酵母中的融合表达
江文正；金宁一；王宏伟；张应玖；金洪涛
关键词：HIV-1, 结构蛋白, 毕赤巴斯德酵母, 融合表达
摘要：目的将中国流行株B亚型HIV-1结构蛋白基因gag和gp120在巴斯德毕赤酵母中进行融合表达.方法以酵母分泌型表达质粒pPIC9为载体, 构建含HIV-1 gag和gp120嵌合基因的重组酵母表达质粒pPICGP.用Sac I 将pPICGP线性化后, 电转化巴斯德毕赤酵母GS115, 用PCR的方法鉴定阳性酵母转化子.阳性转化子在巴斯德毕赤酵母中用甲醇进行诱导表达, 表达产物以SDS-PAGE和Western blot进行分析, 并对阳性菌株的遗传稳定性进行研究. 结果 12个酵母转化子中共筛选到了8个阳性酵母转化子, 其整合率为66.7%.SDS-PAGE和Western blot分析显示, 在相对分子质量(Mr)为57 000处有1条特异蛋白带, 且能与抗p24单抗(mAb)和抗gp120mAb发生反应.酵母转化子在YPD培养基上传代10次后, 其外源基因未丢失.结论在巴斯德毕赤酵母中成功地表达了HIV-1 gag-gp120嵌合基因, 且表达蛋白具有特异性, 但其Mr较预计计算的值要小, 说明嵌合基因中的gp120基因只有部分进行了表达.
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