期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
大鼠IL-6受体基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
李改丽；王百忍；张萍；费玲玲；段晓莉；鞠躬
关键词：IL-6受体, 克隆, 表达
摘要：目的获取大鼠IL-6受体(IL-6R)的基因并高效表达.方法用PCR技术, 从正常成年大鼠脑的cDNA文库中, 获得编码IL-6R基因的序列.测序后, 通过PCR扩增和基因重组, 分别构建IL-6R基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体, 并导入大肠杆菌DH5α中, 通过IPTG诱导表达重组融合蛋白.对表达的羧基端序列编码的融合蛋白过谷胱甘肽琼脂糖柱进行纯化. 结果获得正常成年大鼠IL-6R(98～1 493位)的基因, 测序结果与已发表的基因序列相一致.重组蛋白以包涵体的形式进行表达.经SDS-PAGE分析, 在相对分子质量(Mr)为74 000和43 000处, 各有1条特异的蛋白带.对羧基端基因表达的包涵体形式的蛋白进行变性、重折叠及纯化后, 得到了高纯度融合蛋白.结论成功地克隆正常成年大鼠IL-6R基因, 并在E. Coli DH5α中高效表达, 为进一步制备抗IL-6R抗体和进行原位分子杂交研究创造了条件.
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