期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2001年第03期

可溶性CD14突变体的构建与表达研究

王威;荫俊;王忠泽;王胜朝;白洁;宋伟;张松乐

关键词:CD14, 基因突变, 聚合酶链反应, 基因表达
摘要:目的将人CD14信号转导启动区97~101氨基酸进行丙氨酸置换突变,构建真核表达质粒,并在COS-7细胞中进行表达.方法采用两轮聚合酶链反应定点突变方法,对人可溶性CD14推测中的LPS信号转导启动区之一,N端97~101氨基酸用丙氨酸进行置换突变.将突变PCR片段克隆至载体pGEM-T,进行酶切鉴定及序列分析.将突变基因亚克隆至真核表达质粒pCIneo中,转染C0S-7细胞进行瞬时表达,并用SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白.结果测序结果证实,CD14的N端97~101氨基酸发生了连续丙氨酸置换突变.SDS-PAGE表明,突变体基因在COS-7细胞中得到瞬时表达.Western blot显示,抗CD14多克隆抗体可与重组表达的突变体蛋白特异性结合.结论成功地构建并表达CD14 97~101氨基酸丙氨酸置换突变体,为研究CD14信号转导缺失突变体的生物学活性与功能打下了基础.