期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
全长人穿孔素cDNA的克隆与3'端部分表达
李芳秋；周向阳；秦卫松；武建国
关键词：穿孔素, 基因克隆, 基因表达, 溶血活性
摘要：目的克隆人穿孔素(perforin, PFP)基因并选择性地体外表达抗原特异性C端肽段。方法利用RT-PCR技术，从人肝总RNA中克隆全长PFP cDNA并进行序列测定分析。将编码PFP C端(hPFP-C)125个氨基酸的cDNA片段亚克隆，并插入载体pGEX-2T中用IPTG诱导融合蛋白表达。目的肽段采用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析和凝血酶酶切纯化，并用溶血法测定其生物学活性。结果克隆的全长人PFP cDNA与已发表的PFP基因序列相比较，有4个碱基不同，导致3个氨基酸残基改变。重组基因在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达的融合蛋白的相对分子质量(Mr)为40 000，纯化后的hPFP-C肽段Mr为14 000。重组hPFP-C肽段与兔红细胞共育，呈现钙依赖的溶血活性。结论人PFP基因可能存在多态性，其C端肽段亦有溶解兔红细胞的活性。
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